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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中遇到這些情況應(yīng)該如何處理

更新時(shí)間:2024-02-02      點(diǎn)擊次數(shù):920
細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。
1.細(xì)胞經(jīng)過(guò)運(yùn)輸后,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈撞擊死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900-1000rpm(約150g)離心3min,棄上清。加5ml PBS重懸細(xì)胞,再900-1000rpm(約150g)離心3min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時(shí)碎片比較少,傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。
2.細(xì)胞生長(zhǎng)不均時(shí),可以將細(xì)胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代。
3.細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢時(shí),可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)(最高不超過(guò)20%),也可以根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),選擇傳代細(xì)胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
4.不同細(xì)胞貼壁性差異比較大,所以消化時(shí)間差別較大,20s-10min均有可能,具體以細(xì)胞消化到相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準(zhǔn),嚴(yán)禁消化到細(xì)胞漂浮??蛻粝^(guò)度導(dǎo)致細(xì)胞死亡、漂浮、生長(zhǎng)緩慢,不提供免費(fèi)售后服務(wù)。
5.干冰發(fā)貨均為兩支,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方不提供免費(fèi)售后服務(wù)。
6.細(xì)胞狀態(tài)正常時(shí),應(yīng)盡快凍存細(xì)胞保種,凍存后應(yīng)隨機(jī)抽取一支檢測(cè)凍存效果。我方不對(duì)客戶凍存細(xì)胞導(dǎo)致死亡負(fù)責(zé),客戶凍存細(xì)胞死亡不提供免費(fèi)售后服務(wù)。
 
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