生長因子又被稱之為生長肽，是一類通過與特異的、高親和的細(xì)胞膜受體結(jié)合,調(diào)節(jié)細(xì)胞生長與其他細(xì)胞功能等多效應(yīng)的多肽類物質(zhì)。生長因子子廣泛存在予機(jī)體內(nèi)各種組織，包括成熟組織和胚胎組織，并通過自分泌和或旁分泌方式進(jìn)行調(diào)節(jié)，對機(jī)體的免疫、造血調(diào)控、創(chuàng)傷愈合、血管形成、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡、形態(tài)發(fā)生、胚胎形成等方面產(chǎn)生著重要的調(diào)控作用。

　　在生長因子ELISA試劑盒的檢測過程中，首先需要將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體加入到酶標(biāo)板孔中。這些物質(zhì)會經(jīng)過一段時間的孵育，使得樣本中存在的VEGF與固相抗體和檢測抗體發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。

　　在孵育過程結(jié)束后，需要通過洗滌的方式去除未結(jié)合的物質(zhì)。這一步驟是為了確保后續(xù)的反應(yīng)只發(fā)生在已經(jīng)結(jié)合的VEGF上，從而提高檢測的準(zhǔn)確性。

　　接下來，將辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素加入到酶標(biāo)板孔中。這種酶具有高度的親和力，能夠與生物素化的檢測抗體結(jié)合。再次進(jìn)行洗滌后，加入顯色底物TMB。

　　TMB是一種無色的化合物，但在辣根過氧化物酶的催化下，它會轉(zhuǎn)化為一種有色的產(chǎn)物。因此，當(dāng)TMB加入到酶標(biāo)板孔中后，需要在避光的條件下進(jìn)行顯色反應(yīng)。這樣可以避免光照對顯色反應(yīng)的影響，從而保證顏色反應(yīng)的準(zhǔn)確性。

　　最后，顏色反應(yīng)的深淺與樣本中VEGF的濃度成正比。也就是說，如果樣本中的VEGF濃度較高，那么顏色反應(yīng)就會更深；反之，如果VEGF濃度較低，顏色反應(yīng)就會較淺。通過對比標(biāo)準(zhǔn)品的顏色反應(yīng)，就可以準(zhǔn)確地測定出樣本中VEGF的濃度。

　　生長因子ELISA試劑盒的保存和操作規(guī)范如下：

　　1.試劑盒應(yīng)保存在2-8攝氏度的溫度范圍內(nèi)。在使用前，需要將試劑盒從冰箱中取出，并在室溫下平衡60分鐘。如果濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶現(xiàn)象，這是正常的，可以通過水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。同樣地，樣本也需要在室溫下平衡60分鐘才能使用。

　　2.預(yù)處理后的樣本無需稀釋，可以直接取10μL加樣即可進(jìn)行實驗。

　　3.在進(jìn)行溫育操作時，必須嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量和順序進(jìn)行操作。這樣可以確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

　　4.實驗中未使用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，并密封保存在低溫干燥的環(huán)境中。這樣可以防止板條受到污染或損壞。

　　5.所有液體組分在使用前應(yīng)充分搖勻。這樣可以確保液體組分均勻分布，避免影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。